深圳市芬析儀器制造有限公司針對非洲豬瘟病毒特研發(fā)了CSY-E96D非洲豬瘟病毒快速診斷儀，該儀器采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理,即酶聯(lián)免疫法；可定量快速畜牧類疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍(lán)耳、偽狂犬等疾病，非洲豬瘟病毒快速診斷儀廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場、屠宰場、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)、檢驗檢疫單位使用。

自從2018年8月以來，非洲豬瘟疫情在我國來勢洶洶，盡管采取了嚴(yán)厲措施予以防控，但疫情仍在持續(xù)發(fā)酵中。

事實上，在整個產(chǎn)業(yè)鏈中，從生豬養(yǎng)殖到餐桌，要切實防控疫情，涉及到眾多監(jiān)管部門，離不開多方的群策群力，單靠一個農(nóng)業(yè)農(nóng)村部是無法解決全程問題的。

根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的通報，盡管“我國發(fā)生非洲豬瘟疫情以來，所有已發(fā)疫情均已得到及時有效處置，目前疫情呈點狀發(fā)生，總體可控”，但也承認(rèn)“非洲豬瘟病毒在我國已形成了一定污染面，傳統(tǒng)的生產(chǎn)、流通、消費方式短期內(nèi)難以根本改變，疫情傳播途徑錯綜復(fù)雜，風(fēng)險難以完全阻斷，且目前尚無有效疫苗，以上因素共同決定了防控工作的復(fù)雜性和長期性”。

非洲豬瘟病毒快速診斷儀樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

非洲豬瘟病毒快速診斷儀操作步驟：

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；

3.待測樣本孔加待測樣本10μL，樣本稀釋液40μL；

4.隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入非洲豬瘟病毒快速診斷儀辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗原100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光水浴鍋孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在非洲豬瘟病毒快速診斷儀450nm波長處測定各孔的OD值。